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            细胞课堂:细胞传代方法您做对了吗?


            发布日期:[2016-11-08] 共阅[632]次

            上海劲马的长期发展目标是以化学试剂为基础,产品线逐步扩展到抗体、蛋白组学、基因组学、分离材?#31995;?#39640;科技试剂领域,通过自主研发和兼并重组不断扩展企业产品线,逐步发展为试剂的专业制造商和电子商务集成供应商,成为全球试剂行业发展的者。开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全。

            细胞与试剂方面:

            1、细胞(单层细胞,镜检适合)

            2、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)

            3、灭活小牛血清、庆大霉素溶?#28023;? 万单位)

            4、7.5%NaHC03 溶液

            5、0.25%胰蛋白酶

            6、 PBS 洗液。

            实验小用具方面:

            1、小方瓶(100m1)

            2、克氏瓶

            3、胶塞

            4、吸管(10ml、1m1)

            5、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至少15 分钟高压灭菌)

            6、C02 孵箱

            7、超净台

            8、倒置显微镜

            9、4℃、- 20℃冰箱

            细胞传代的操作步骤

            1、挑选细胞:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。

            2、配制细胞培养?#28023;?#25353;以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。

            3、消化细胞?#21512;?#29992;PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次,每次10m1,弃去洗?#28023;?#21521;细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶?#28023;科?m1,细胞?#31185;椒牛?#20351;消化液完全覆盖细胞表面。

            4、至细胞完全脱落到胰酶中?#22909;科?#21152;入10m1 细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装,?#32531;?#34917;加?#20102;?#38656;培养量。

            5、加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4 天成片(由细胞接种浓度决定)。

            6、填写传代记录。

            上海劲马生物科技有限公司专业提供科研类进口原装、进口分装全系列品牌酶联免疫ELISA试剂盒。产品种类齐全、现货供应质量长期保障,是多家科研机构和高校指定ELISA试剂盒供应商,欢迎各位新老客户惠顾!

             

            主营:ELISA检测试剂盒;免疫组化试剂盒,胎牛血清;酶联免疫试剂盒,进口抗体,生物试剂 公司地址:上海市闵行区莘庄工业园区金都路3688号E幢101-106室 ?#25910;?#32534;码:201100 
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