1. <output id="pm3gn"><button id="pm3gn"></button></output>

          <listing id="pm3gn"><object id="pm3gn"></object></listing>

             
            返回首页
            收藏本站
            设为主页
             
            首页 公司介绍 产品展示 公司新闻 技术文章 招聘信息 询价留言 联系我们
              现在是:
              产品搜索
            请在下面的文本框中输入产品关键字进行搜索:
             
             
              您所在的位置:上海劲马生物科技有限公司 >>> 解决方案
          1.   产品大类
            代理品牌
            胎牛血清
            ELISA试剂盒
            放免试剂盒
            生物试剂
            USP试剂
            酶联免疫试剂盒
            其他方法试剂盒
            抗体
            对照品
            培养基
            免疫化学产品
            细胞株
             
              解决方案  

            攻克ELISA实验,您需要搞定这些问题


            发布日期:[2018-01-17] 共阅[483]次

               ELISA实验是免疫学研究中zui常用的实验方法之一。很多?#21496;?#24471;ELISA很简单,其实不然。上海劲马带您绕开ELISA实验中出现的各种问题,轻松搞定ELISA实验~

            常见问题分析:
            1.标曲不显色或显色很弱,样本显色:
              溶解标准品以?#27688;?#27604;稀释时,?#27425;行?#38663;荡或不够充分。
              标准品溶解、倍比稀释?#26412;?#38656;要?#34892;?#38663;荡以保证充分混?#21462;?#21333;纯依靠移液器反复?#33633;潁?#25928;率?#31995;汀?#25928;果也不一定zui好。
            2.标曲和样本均不显色:
               在孵育阶段静置在桌面上,这样非常不利于抗原抗体之间的充分接触,导致显色偏弱。
               推荐孵育阶段,使用ELISA专用的微?#35013;?#25391;荡器,调至合?#23454;?#39057;率,使抗原抗体充分接触,保证结合效果。如果排除上述原因,有可能是漏加了某个组分,如检测抗体、酶?#21462;?#23545;于比较马虎的新手,一定要做好标记和记录,或者使用添加染?#31995;腅LISA试剂盒。
            3.标曲显色,样本不显色:
               当样本中目的蛋白浓度极低或者样本中干扰因素较强,就无法检测到。目前ELISA仍然是蛋?#20934;?#27979;灵敏度zui高的方法,与不同技术结合后,衍生出了多种类型的ELISA,提高了检测灵敏?#21462;?br />   对于目的蛋白浓度特别低的样本,可以尝试?#37238;?#25935;ELISA,但这也并不意味着一定能检测到样本浓度,只能说可以提高样本的可测率,并使结果更加可靠。因为通常用普通ELISA检测的样本OD值都偏低,而高敏ELISA可提高样本OD值,使之尽量位于标曲?#27573;?#20869;,得到的数值也更加可信。
            4.标曲和样本都显色,但?#32431;?#30340;CV大:
               这个问题就跟移液器和实验者的操作有关了。移液器的使用维护不规范,就会造成移液的误差较大;实验者自身的操作习惯、加样的一致性对?#32431;?#30340;CV也有很大影响。
               掌握移液器的正确使用和维护。关于个人的操作可练习移液动作、加快速度,确保移液的精密?#21462;?br />5.本底偏高,样本值测不到:
               标曲的本?#20934;碆lank孔的OD值一般要求控制在0.1以下(对于高敏ELISA可以?#23454;?#25918;宽要求)。尤其是样本值特别低的时候,本底过高会掩盖目的信?#29275;?#23548;致无法测到样本值。
               在加入TMB显色后,需实时观察标曲显se情况。通常在S5孔有肉眼可见的微弱蓝色,?#32431;?#32456;止反应。
            6.样本经不同梯度稀释,计算得到的样本值差异较大:
               有时候我们不清楚样本中目的蛋白的浓度如何,应该如何稀释,那么我们就会做下预实验,确定稀释倍数。然而有时候同一样本做了几个不同梯度稀释后,计算得到的样本值之间差异较大,应该选择哪一个稀释倍数呢?
               这里涉及到了基质效应。通常血清样本加样量?#32454;?#26102;,血清中的各种蛋白会?#31181;?#25239;原抗体的接触,基质效应较明显。而经过稀释后,干扰因素也随之稀释,影响就会较小。当某两个梯度稀释后,计算得到的样本值接近时,我们就可以认为在该稀释梯度时,样本中的干扰因素影响较小,计算得到的值也是接近真实的。然而这样的稀释是针对目的蛋白浓度?#32454;?#30340;样本而言。对于浓度很低的样本,经过多倍稀释后,就更加测不到了,此时可按照厂家?#24471;?#20070;推荐的加样方式操作。
            7.不同试剂盒中的组分能否通用:
               除非是公用的试剂如洗液、检测缓冲?#28023;?#20854;它组分不建议用其它试剂盒的组分,甚至是同一指标不同批次的试剂盒里的组分。这些组分(包括标准品、标准品稀释液、检测抗体、酶等)都是经过优化的,如果贸然使用其它试剂盒的组分,有可能对结果产生影响。

            关于酶联免疫吸附(ELISA)实验:
              1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者VanWeerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物?#23454;?#22266;相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)。

                                     
            酶联免疫吸附(ELISA)用于:
            (1)免疫酶染色各种细胞内成份的定位;
            (2)研究抗酶抗体的合成;
            (3)显现微量的免疫沉淀反应;
            (4)定量检测体液中抗原或抗体成份。

             

            主营:ELISA检测试剂盒;免疫组化试剂盒,胎牛血清;酶联免疫试剂盒,进口抗体,生物试剂 公司地址:上海市闵行区莘庄工业园区金都路3688号E幢101-106室 ?#25910;?#32534;码:201100 
            联系人:钱勇强 联系电话:13636351217传真号码:86-021-64881400 
             管理登陆 ICP备:沪ICP备15015681号-2 GoogleSitemap

             

            环保在线

            推荐收藏该企?#20302;?#31449;
            多乐彩开奖公告

                1. <output id="pm3gn"><button id="pm3gn"></button></output>

                    <listing id="pm3gn"><object id="pm3gn"></object></listing>

                          1. <output id="pm3gn"><button id="pm3gn"></button></output>

                              <listing id="pm3gn"><object id="pm3gn"></object></listing>

                                乌迪内斯对萨索洛 舞线APP下载 老11选5分析软件 fifa手游经验卡 北京赛车25u平台出租 安徽快3走势图 全民突击枪械涂装 星际争霸中文补丁 躲猫猫在线客服 彩票论坛福彩体彩全国最大 湖北30选5开奖查询结果 里昂惕夫之谜是什么 英魂之刃手游 法国里尔第三大学 澳洲幸运5玩法 中国竞彩网竞彩足球直播比分
                                扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
                                访问手机站