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            兔白细胞介素6(IL-6)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

            点击次数:172 发布时间:2017/3/16
            提 供 商: 上海劲马生物科技有限公司 资料大小: JPG
            图片类型: JPG 下载次数: 35
            资料类型: PDF 浏览次数: 172
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                         兔白细胞介素6(IL-6)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
            本试剂盒仅供研究使用。
            检测范围: 96T
            5ng/L - 160ng/L
            使用目的:
            本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素6(IL-6)含量。
            实验原理
            本试剂盒应用双抗体?#34892;?#27861;测定标本中兔白细胞介素6(IL-6)水平。用纯化的兔白细胞
            介素6(IL-6)抗体包被微?#35013;澹?#21046;成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素
            6(IL-6),再与HRP 标记的白细胞介素6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
            经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
            转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样?#20998;?#30340;白细胞介素6(IL-6)?#25910;?#30456;关。用酶标仪在450nm
            波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样?#20998;?#20820;白细胞介素6(IL-6)浓?#21462;?br />试剂盒组成
            1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
            2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(320ng/L) 0.5ml×1 瓶
            3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
            4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
            5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
            6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
            标本要求
            1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
            马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
            2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 ?#31181;?#36771;根过氧化物酶的(HRP)活性。
            操作步骤
            1. 标准?#36820;?#31232;释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
            释。
            160ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
            80ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
            40ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
            20ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
            10ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
            2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
            待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
            ?#32531;?#20877;加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
            量不触及孔壁,轻轻晃动混?#21462;?br />3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
            4. 配?#28023;?#23558;30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
            5. 洗涤?#30418;?#24515;揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每?#20934;?#28385;洗涤?#28023;?#38745;置30 秒后弃去,如此
            重复5 次,拍干。
            6. 加酶:每?#20934;?#20837;酶标试剂50μl,空白孔除外。
            7. 温育:操作同3。
            8. 洗涤:操作同5。
            9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
            15 分钟.
            10. 终止:每?#20934;?#32456;止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
            11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
            液后15 分钟以内进行。
            操作程序总结:


            计算
            以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样?#36820;?br />OD ?#28068;?#26631;准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
            准曲线的直线回归方程式,将样?#36820;腛D 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
            即为样?#36820;?#23454;际浓?#21462;?br />注意事项
            1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
            用完,板条应装入密封袋中保存。
            2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
            3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好
            控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
            4. 请每次测定的同时做标准曲线,zui好做?#32431;住?#22914;标本中待测物质含?#25239;?#39640;(样本OD 值
            大于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释?#21512;?#37322;一定倍数(n 倍)后再测定,计
            算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
            5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
            6.底物请避光保存。
            7.?#32454;?#25353;照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
            8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
            9.本试剂不同批号组分不得混用。
            10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
            保存条件及有效期
            1.试剂盒保存?#28023;?-8℃。
            2.有效期:6 个月

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            主营:ELISA检测试剂盒;免疫组化试剂盒,胎牛血清;酶联免疫试剂盒,进口抗体,生物试剂 公司地址:上海市闵行区莘庄工业园区金都路3688号E幢101-106室 ?#25910;?#32534;码:201100 
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